GB18883 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

　　1、范圍

　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了室內(nèi)空氣質(zhì)量參數(shù)及檢驗方法。

　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于住宅和辦公建筑物。

　　2、規(guī)范性引用文件

　　下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改(不包括勘誤內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達成的各方研究是否可使用這些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件，其*新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

　　GB 6921-86 大氣飄塵濃度測定方法 重量法

　　GB 9801-88 空氣質(zhì)量 一氧化碳的測定 非分散紅外法

　　GB 11737-89 居住區(qū)大氣中苯、甲苯和二甲苯衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法

　　GB 12372-90 居住區(qū)大氣中二氧化氮檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 改進的 Saltzman 法

　　GB/T 14679-93 空氣質(zhì)量 氨的測定 次氯酸鈉 - 水楊酸分光光度法

　　GB/T 14669-93 空氣質(zhì)量 氨的測定 離子選擇電極法

　　GB/T 14582-93 環(huán)境空氣中氡的標(biāo)準(zhǔn)測量方法

　　GB 14677-93 空氣質(zhì)量 甲苯、二甲苯、苯乙烯的測定 氣相色譜法

　　GB/T 15262-94 環(huán)境空氣 二氧化硫的測定 甲醛吸收 - 副玫瑰苯胺分光光度法

　　GB/T 15435-1995 環(huán)境空氣 二氧化氮的測定 Saltzman 法

　　GB/T 15438-1995 環(huán)境空氣 臭氧的測定 紫外光度法

　　GB/T 15439-1995 環(huán)境空氣 苯并 [a] 芘測定 高效液相色譜法

　　GB/T 15516-1995 空氣質(zhì)量 甲醛的測定 乙酰丙酮分光光度法

　　GB/T 16128-1995 居住區(qū)大氣中二氧化硫衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 甲醛溶液吸收 - 鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法

　　GB/T 16129-1995 居住區(qū)大氣中甲醛衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 分光光度法

　　GB/T 16146-1995 住房內(nèi)氡濃度控制標(biāo)準(zhǔn)

　　GB/T 16147-1995 空氣中氡濃度的閃爍瓶測量方法

　　GB/T 17095-1997 室內(nèi)空氣中可吸入顆粒物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

　　GB/T 18204.18-2000 公共場所室內(nèi)新風(fēng)量測定方法—示蹤氣體法

　　GB/T 18204.23-2000 公共場所空氣中一氧化碳檢驗方法

　　GB/T 18204.24-2000 公共場所空氣中二氧化碳檢驗方法

　　GB/T 18204.25-2000 公共場所空氣中氨檢驗方法

　　GB/T 18204.26-2000 公共場所空氣中甲醛測定方法

　　GB/T 18204.27-2000 公共場所空氣中臭氧檢驗方法

　　5 室內(nèi)空氣質(zhì)量檢驗

　　5.1 室內(nèi)空氣中各種化學(xué)污染物采樣和檢驗方法見附錄 A 和附錄 B 。

　　5.2 室內(nèi)空氣中苯濃度的測定方法見附錄 C 。

　　5.3 室內(nèi)空氣中總揮發(fā)性有機物( TVOC )的檢驗方法見附錄 D 。

　　5.4 室內(nèi)空氣中**總數(shù)檢驗方法見附錄 E 。

　　5.5 室內(nèi)熱環(huán)境參數(shù)的檢驗方法見附錄 F 。

　　附錄 A

　　(規(guī)范性附錄)

　　室內(nèi)空氣采樣技術(shù)導(dǎo)則

　　1、范圍

　　本導(dǎo)則在進行室內(nèi)空氣污染物監(jiān)測時，對采樣點位，采樣高度，采樣時間和頻率，以及采樣方法和質(zhì)量保證措施等項做出規(guī)定。本導(dǎo)則作為《室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》配套的空氣采樣技術(shù)的指導(dǎo)原則，適用于《室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中所規(guī)定的各種化學(xué)污染物的采樣。

　　2、選點要求

　　2.1 采樣點的數(shù)量：采樣點的數(shù)量根據(jù)監(jiān)測室內(nèi)面積大小和現(xiàn)場情況而確定，以期能正確反映室內(nèi)空氣污染物的水平。原則上小于50m 2 的房間應(yīng)設(shè) 1~3 個點; 50~100m 2 設(shè) 3~5 個點; 100m 2 以上至少設(shè) 5個點。在對角線上或梅花式均勻分布。

　　2.2 采樣點應(yīng)避開通風(fēng)口，離墻壁距離應(yīng)大于 0.5m 。

　　2.3 采樣點的高度：原則上與人的呼吸帶高度相一致。相對高度 0.5m~1.5m 之間。

　　3、采樣時間和頻率

　　采樣前至少關(guān)閉門窗 4 小時。日平均濃度至少連續(xù)采樣 18 小時， 8 小時平均濃度至少連續(xù)采樣 6 小時， 1小時平均濃度至少連續(xù)采樣 45 分鐘。

　　4、采樣方法和采樣儀器

　　根據(jù)污染物在室內(nèi)空氣中存在狀態(tài)，選用合適的采樣方法和儀器，用于室內(nèi)的采樣器的噪聲應(yīng)小于 50dB。具體采樣方法應(yīng)按各個污染物檢驗方法中規(guī)定的方法和操作步驟進行。

　　5、采樣的質(zhì)量保證措施

　　5.1 氣密性檢查：有動力采樣器在采樣前應(yīng)對采樣系統(tǒng)氣密性進行檢查，不得漏氣。

　　5.2 流量校準(zhǔn)：采樣系統(tǒng)流量要能保持恒定，采樣前和采樣后要用**皂膜計校準(zhǔn)采樣系統(tǒng)進氣流量，誤差不超過 5% 。

　　采樣器流量校準(zhǔn)：在采樣器正常使用狀態(tài)下，用**皂膜計校準(zhǔn)采樣器流量計的刻度，校準(zhǔn) 5個點，繪制流量標(biāo)準(zhǔn)曲線。記錄校準(zhǔn)時的大氣壓力和溫度。

　　5.3空白檢驗：在一批現(xiàn)場采樣中，應(yīng)留有兩個采樣管不采樣，并按其他樣品管一樣對待，作為采樣過程中空白檢驗，若空白檢驗超過控制范圍，則這批樣品作廢。

　　5.4 儀器使用前，應(yīng)按儀器說明書對儀器進行檢驗和標(biāo)定。

　　5.5 在計算濃度時應(yīng)用下式將采樣體積換算成標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的體積：

　　式中 V 0 —換算成標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的采樣體積， L ;

　　V —采樣體積， L ;

　　T 0 —標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)的**溫度， 273K ;

　　T —采樣時采樣點現(xiàn)場的溫度( t )與標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)的**溫度之和，( t+273 ) K ;

　　P 0 —標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的大氣壓力， 101.3kPa ;

　　P —采樣時采樣點的大氣壓力， kPa 。

　　5.6 每次平行采樣，測定之差與平均值比較的相對偏差不超過 20% 。

　　6、記錄和報告

　　采樣時要對現(xiàn)場情況、各種污染源、采樣日期、時間、地點、數(shù)量、布點方式、大氣壓力、氣溫、相對濕度、風(fēng)速以及采樣者簽字等做出詳細(xì)記錄，隨樣品一同報到實驗室。

　　附錄 B

　　(規(guī)范性附錄)

　　室內(nèi)空氣中各種參數(shù)的檢驗方法 *

　　污染物 檢驗方法 來源

　　(1) 二氧化硫 SO 2 甲醛溶液吸收 —— 鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法 ( 1 ) GB/T 16128-1995

　　( 2 ) GB/T 15262-94

　　(2) 二氧化氮 NO 2 改進的 Saltzaman 法 ( 1 ) GB/ 12372-90

　　( 2 ) GB/T 15435-1995

　　(3) 一氧化碳 CO ( 1 )非分散紅外法

　　( 2 )不分光紅外線氣體分析法 、氣相色譜法 、汞置換法 ( 1 ) GB 9801-88

　　<, SPAN style="FONT-SIZE: 9pt; COLOR: #666666; FONT-FAMILY:宋體; mso-ascii-font-family: 'Times New Roman';mso-hansi-font-family: 'Times New Roman'">( 2 ) GB/T18204.23-2000

　　(4) 二氧化碳 CO 2 ( 1 )不分光紅外線氣體分析法

　　( 2 )氣相色譜法

　　( 3 )容量滴定法 GB/T 18204.24-2000

　　(5) 氨 NH3 ( 1 )靛酚藍(lán)分光光度法

　　納氏試劑分光光度法

　　( 2 )離子選擇電極法

　　( 3 )次氯酸鈉—水楊酸分光光度法 ( 1 ) GB/T 18204.25-2000

　　( 2 ) GB/T 14669-93

　　( 3 ) GB/T 14679-93

　　(6) 臭氧 0 3 ( 1 )紫外光度法

　　( 2 )靛藍(lán)二磺酸鈉分光光度法 ( 1 ) GB/T 15438-1995

　　( 2 ) GB/T 18204.27-2000

　　(7) 甲醛 HCHO ? AHMT 分光光度法

　　? 酚試劑分光光度法

　　氣相色譜法

　　( 3 )乙酰丙酮分光光度法 ( 1 ) GB/T 16129-95

　　( 2 ) GB/T 18204.26-2000

　　( 3 ) GB/T 15516-95

　　(8) 苯 C 6 H 6 氣相色譜法 ? 附錄 C

　　( 2 ) GB 11737-89

　　( 9 ) 甲苯 C 7 H 8 、

　　二甲苯 C 8 H 10 氣相色譜法 GB 14677-93

　　(10) 苯并 [a] 芘

　　B(a)P 高壓液相色譜法 GB/T 15439-1995

　　(11) 可吸入顆粒

　　PM10 撞擊式 —— 稱重法 GB/T 17095-1997

　　(12) 總揮發(fā)性有機物

　　TVOC 氣相色譜法 附錄 D

　　(13) **總數(shù) 撞擊法 附錄 E

　　(14) 溫度、相對濕度、空氣流速 熱環(huán)境參數(shù)的檢驗方法 附錄 F

　　(15) 新風(fēng)量 示蹤氣體法 GB/T18204.18-2000

　　(16) 氡 Rn ( 1 )空氣中氡濃度的閃爍瓶測量方法

　　( 2 )環(huán)境空氣中氡的標(biāo)準(zhǔn)測量方法 ( 1 ) GB/T 16147-1995

　　( 2 ) GB/T 14582-93

　　* 注：檢驗方法中( 1 )法為仲裁法。

　　附錄 C

　　(規(guī)范性附錄)

　　空氣中苯濃度的測定

　　(毛細(xì)管氣相色譜法)

　　1、方法提要

　　1.1 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和依據(jù)

　　本方法主要依據(jù) GB 11737-89 居住區(qū)大氣中苯、甲苯和二甲苯衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法—氣相色譜法。

　　1.2原理：空氣中苯用活性炭管采集，然后用二硫化碳提取出來。用氫火焰離子化檢測器的氣相色譜儀分析，以保留時間定性，峰高定量。

　　1.3 干擾和排除：空氣中水蒸汽或水霧量太大，以至在碳管中凝結(jié)時，嚴(yán)重影響活性炭的穿透容量和采樣效率。空氣濕度在 90%時，活性炭管的采樣效率仍然符合要求。空氣中的其他污染物干擾，由于采用了氣相色譜分離技術(shù)，選擇合適的色譜分離條件可以消除。

　　2、適用范圍

　　2.1 測定范圍：采樣量為 20L 時，用 1ml 二硫化碳提取，進樣 1μl ，測定范圍為 0.05~10 mg/m 3。

　　2.2 適用場所：本法適用于室內(nèi)空氣和居住區(qū)大氣中苯濃度的測定。

　　3、試劑和材料

　　3.1 苯：色譜純。

　　3.2 二硫化碳：分析純，需經(jīng)純化處理，保證色譜分析無雜峰。

　　3.3 椰子殼活性炭： 20~40 目，用于裝活性炭采樣管。

　　3.4 純氮： 99.99% 。

　　4、儀器和設(shè)備

　　4.1 活性炭采樣管：用長 150mm ，內(nèi)徑 3.5~4.0mm ，外徑 6mm 的玻璃管，裝入 100mg椰子殼活性炭，兩端用少量玻璃棉固定。裝好管后再用純氮氣于 300~350 ℃溫度條件下吹 5~10min，然后套上塑料帽封緊管的兩端。此管放于干燥器中可保存 5 天。若將玻璃管熔封，此管可穩(wěn)定三個月。

　　4.2 空氣采樣器：流量范圍 0.2~1L/min，流量穩(wěn)定。使用時用皂膜流量計校準(zhǔn)采樣系統(tǒng)在采樣前和采樣后的流量。流量誤差應(yīng)小于 5% 。

　　4.3 注射器： 1ml 。體積刻度誤差應(yīng)校正。

　　4.4 微量注射器： 1μl ， 10μl 。體積刻度誤差應(yīng)校正。

　　4.5 具塞刻度試管： 2ml 。

　　4.6 氣相色譜儀：附氫火焰離子化檢測器。

　　4.7 色譜柱： 0.53mm × 30mm 寬徑非極性石英毛細(xì)管柱。

　　5、采樣和樣品保存

　　在采樣地點打開活性炭管，兩端孔徑至少 2mm ，與空氣采樣器入氣口垂直連接，以 0.5L/min 的速度，抽取 20L空氣。采樣后，將管的兩端套上塑料帽，并記錄采樣時的溫度和大氣壓力。樣品可保存 5 天。

　　6、分析步驟

　　6.1色譜分析條件：由于色譜分析條件常因?qū)嶒灄l件不同而有差異，所以應(yīng)根據(jù)所用氣相色譜儀的型號和性能，制定能分析苯的*佳的色譜分析條件。

　　6.2 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定計算因子：在與樣品分析的相同條件下，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定計算因子。

　　6.2.1 用標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：于 5.0ml 容量瓶中，先加入少量二硫化碳，用 1μL 微量注射器準(zhǔn)確取一定量的苯(20 ℃時， 1μl 苯重 0.8787mg)注入容量瓶中，加二硫化碳至刻度，配成一定濃度的儲備液。臨用前取一定量的儲備液用二硫化碳逐級稀釋成苯含量分別為 2.0 、 5.0 、10.0 、 50.0μg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)液。取 1μL 標(biāo)準(zhǔn)液進樣，測量保留時間及峰高。每個濃度重復(fù) 3 次，取峰高的平均值。分別以1μL 苯的含量( μg/ml )為橫坐標(biāo)( μg )，平均峰高為縱坐標(biāo)( mm )，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。并計算回歸線的斜率，以斜率的倒數(shù)Bs[μg/mm] 作樣品測定的計算因子。

　　6.3 樣品分析：將采樣管中的活性炭倒入具塞刻度試管中，加 1.0ml 二硫化碳，塞緊管塞，放置 1h ，并不時振搖。取1μl 進樣，用保留時間定性，峰高( mm)定量。每個樣品作三次分析，求峰高的平均值。同時，取一個未經(jīng)采樣的活性炭管按樣品管同時操作，測量空白管的平均峰高( mm )。

　　7、結(jié)果計算

　　7.1 將采樣體積按式( 1 )換算成標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的采樣體積

　　式中 c —空氣中苯或甲苯、二甲苯的濃度， mg/m 3 ;

　　h —樣品峰高的平均值， mm ;

　　h ' —空白管的峰高， mm ;

　　B s —由 6.2.1 得到的計算因子， μg/mm ;

　　E s —由實驗確定的二硫化碳提取的效率;

　　V 0 —標(biāo)準(zhǔn)狀況下采樣體積， L 。

　　8、方法特性

　　8.1 檢測下限：采樣量為 20L 時，用 1ml 二硫化碳提取，進樣 1μl ，檢測下限為 0.05mg/m 3 。

　　8.2 線性范圍： 10 6 。

　　8.3 精密度：苯的濃度為 8.78 和 21.9μg/ml 的液體樣品，重復(fù)測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 7% 和 5% 。

　　8.4 準(zhǔn)確度：對苯含量為 0.5 ， 21.1 和 200μg 的回收率分別為 95% ， 94% 和 91% 。

　　附錄 D

　　(規(guī)范性附錄)

　　室內(nèi)空氣中總揮發(fā)性有機物( TVOC )的檢驗方法

　　(熱解吸 / 毛細(xì)管氣相色譜法)

　　1、方法提要

　　1.1 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和依據(jù)

　　ISO 16017-1 “Indoor ， ambiant and workplace air — Sampling andanalysis of volatile organic compounds by sorbent tube/thermaldesorption/capillary gas chromatography — part 1 ： pumped sampling”

　　1.2 原理

　　選擇合適的吸附劑( Tenax GC 或 Tenax TA)，用吸附管采集一定體積的空氣樣品，空氣流中的揮發(fā)性有機化合物保留在吸附管中。采樣后，將吸附管加熱，解吸揮發(fā)性有機化合物，待測樣品隨惰性載氣進入毛細(xì)管氣相色譜儀。用保留時間定性，峰高或峰面積定量。

　　1.3 干擾和排除

　　采樣前處理和活化采樣管和吸附劑，使干擾減到*小;選擇合適的色譜柱和分析條件，本法能將多種揮發(fā)性有機物分離，使共存物干擾問題得以解決。

　　2、適用范圍

　　2.1 測定范圍：本法適用于濃度范圍為 0.5 m g/m 3 ~100mg/m 3 之間的空氣中 VOC S 的測定。

　　2.2 適用場所：本法適用于室內(nèi)、環(huán)境和工作場所空氣，也適用于評價小型或大型測試艙室內(nèi)材料的釋放。

　　3、試劑和材料

　　分析過程中使用的試劑應(yīng)為色譜純;如果為分析純，需經(jīng)純化處理，保證色譜分析無雜峰。

　　3.1 VOC S ：為了校正濃度，需用 VOC S作為基準(zhǔn)試劑，配成所需濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)氣體，然后采用液體外標(biāo)法或氣體外標(biāo)法將其定量注入吸附管。

　　3.2 稀釋溶劑：液體外標(biāo)法所用的稀釋溶劑應(yīng)為色譜純，在色譜流出曲線中應(yīng)與待測化合物分離。

　　3.3 吸附劑：使用的吸附劑粒徑為 0.18~0.25mm ( 60~80目)，吸附劑在裝管前都應(yīng)在其*高使用溫度下，用惰性氣流加熱活化處理過夜。為了防止二次污染，吸附劑應(yīng)在清潔空氣中冷卻至室溫，儲存和裝管。解吸溫度應(yīng)低于活化溫度。由制造商裝好的吸附管使用前也需活化處理。

　　3.4 純氮： 99.99% 。

　　4、儀器和設(shè)備

　　4.1 吸附管：是外徑 6.3mm 內(nèi)徑 5mm 長 90mm內(nèi)壁拋光的不銹鋼管，吸附管的采樣入口一端有標(biāo)記。吸附管可以裝填一種或多種吸附劑，應(yīng)使吸附層處于解吸儀的加熱區(qū)。根據(jù)吸附劑的密度，吸附管中可裝填200~1000mg的吸附劑，管的兩端用不銹鋼網(wǎng)或玻璃纖維毛堵住。如果在一支吸附管中使用多種吸附劑，吸附劑應(yīng)按吸附能力增加的順序排列，并用玻璃纖維毛隔開，吸附能力*弱的裝填在吸附管的采樣人口端。

　　4.2 注射器：可**讀出 0.1 m L 的 10 m L 液體注射器;可**讀出 0.1 m L 的 10 m L氣體注射器;可**讀出 0.01mL 的 1mL 氣體注射器。

　　4.3 采樣泵：恒流空氣個體采樣泵，流量范圍 0.02~0.5L/min，流量穩(wěn)定。使用時用皂膜流量計校準(zhǔn)采樣系統(tǒng)在采樣前和采樣后的流量。流量誤差應(yīng)小于 5% 。

　　4.4 氣相色譜儀：配備氫火焰離子化檢測器、質(zhì)譜檢測器或其他合適的檢測器。

　　色譜柱：非極性(極性指數(shù)小于 10 )石英毛細(xì)管柱。

　　4.5熱解吸儀：能對吸附管進行二次熱解吸，并將解吸氣用惰性氣體載帶進入氣相色譜儀。解吸溫度、時間和載氣流速是可調(diào)的。冷阱可將解吸樣品進行濃縮。

　　4.6液體外標(biāo)法制備標(biāo)準(zhǔn)系列的注射裝置：常規(guī)氣相色譜進樣口，可以在線使用也可以獨立裝配，保留進樣口載氣連線，進樣口下端可與吸附管相連。

　　5、采樣和樣品保存

　　將吸附管與采樣泵用塑料或硅橡膠管連接。個體采樣時，采樣管垂直安裝在呼吸帶;固定位置采樣時，選擇合適的采樣位置。打開采樣泵，調(diào)節(jié)流量，以保證在適當(dāng)?shù)臅r間內(nèi)獲得所需的采樣體積(1~10L )。如果總樣品量超過 1mg ，采樣體積應(yīng)相應(yīng)減少。記錄采樣開始和結(jié)束時的時間、采樣流量、溫度和大氣壓力。

　　采樣后將管取下，密封管的兩端或?qū)⑵浞湃肟擅芊獾慕饘倩虿ＡЧ苤小悠房杀４?5 天。

　　6、分析步驟

　　6.1 樣品的解吸和濃縮

　　將吸附管安裝在熱解吸儀上，加熱，使有機蒸氣從吸附劑上解吸下來，并被載氣流帶入冷阱，進行預(yù)濃縮，載氣流的方向與采樣時的方向相反。然后再以低流速快速解吸，經(jīng)傳輸線進入毛細(xì)管氣相色譜儀。傳輸線的溫度應(yīng)足夠高，以防止待測成分凝結(jié)。解吸條件( 見表 1) 。

　　表 1 解吸條件

　　解吸溫度 250 ℃ ~325 ℃

　　解吸時間 5~15min

　　解吸氣流量 30~50ml/min

　　冷阱的制冷溫度 +20 ℃ ~-180 ℃

　　冷阱的加熱溫度 250 ℃ ~350 ℃

　　冷阱中的吸附劑 如果使用，一般與吸附管相同， 40~100mg

　　載氣 氦氣或高純氮氣

　　分流比 樣品管和二級冷阱之間以及二級冷阱和分析柱之間的分流比應(yīng)根據(jù)空氣中的濃度來選擇

　　6.2 色譜分析條件

　　可選擇膜厚度為 1 ～ 5 m m 50m × 0.22mm 的石英柱，固定相可以是二甲基硅氧烷或 7% 的氰基丙烷、 7%的苯基、 86% 的甲基硅氧烷。柱操作條件為程序升溫，初始溫度 50 ℃保持 10min ，以 5 ℃ /min 的速率升溫至 250℃。

　　6.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

　　氣體外標(biāo)法：用泵準(zhǔn)確抽取 100 m g/m 3 的標(biāo)準(zhǔn)氣體 100ml 、 200ml 、 400ml 、 1L 、 2L、 4L 、 10L 通過吸附管，制備標(biāo)準(zhǔn)系列。

　　液體外標(biāo)法：利用 4.6 的進樣裝置取 1~5 m l 含液體組分 100 m g/ml 和 10 m g/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液注入吸附管，同時用 100ml/min 的惰性氣體通過吸附管， 5min 后取下吸附管密封，制備標(biāo)準(zhǔn)系列。

　　用熱解吸氣相色譜法分析吸附管標(biāo)準(zhǔn)系列，以扣除空白后峰面積的對數(shù)為縱坐標(biāo)，以待測物質(zhì)量的對數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　6.4 樣品分析

　　每支樣品吸附管按繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作步驟(即相同的解吸和濃縮條件及色譜分析條件)進行分析，用保留時間定性，峰面積定量。

　　7、結(jié)果計算

　　7.1 將采樣體積按式( 1 )換算成標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的采樣體積

　　式中 V 0 —換算成標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的采樣體積， L ;

　　V —采樣體積， L ;

　　T 0 —標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)的**溫度， 273K ;

　　T —采樣時采樣點現(xiàn)場的溫度( t )與標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)的**溫度之和，( t+273 ) K ;

　　P 0 —標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的大氣壓力， 101.3kPa ;

　　P —采樣時采樣點的大氣壓力， kPa 。

　　7.2 TVOC 的計算

　　( 1 )應(yīng)對保留時間在正己烷和正十六烷之間所有化合物進行分析。

　　( 2 )計算 TVOC ，包括色譜圖中從正己烷到正十六烷之間的所有化合物。

　　( 3 )根據(jù)單一的校正曲線，對盡可能多的 VOC S 定量，至少應(yīng)對十個*高峰進行定量，*后與 TVOC一起列出這些化合物的名稱和濃度。

　　( 4 )計算已鑒定和定量的揮發(fā)性有機化合物的濃度 S id 。

　　( 5 )用甲苯的響應(yīng)系數(shù)計算未鑒定的揮發(fā)性有機化合物的濃度 S un 。

　　( 6 ) S id 與 S un 之和為 TVOC 的濃度或 TVOC 的值。

　　( 7 )如果檢測到的化合物超出了( 2 )中 VOC 定義的范圍，那么這些信息應(yīng)該添加到 TVOC 值中。

　　7.3 空氣樣品中待測組分的濃度按( 2 )式計算

　　式中 : c —空氣樣品中待測組分的濃度 , mg /m 3 ;

　　F —樣品管中組分的質(zhì)量 , mg ;

　　B —空白管中組分的質(zhì)量 , mg;

　　V 0 —標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的采樣體積， L 。

　　8、方法特性

　　8.1 檢測下限：采樣量為 10L 時，檢測下限為 0.5 m g/m 3 。

　　8.2 線性范圍： 10 6 。

　　8.3 精密度：在吸附管上加入 10μg 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液， Tenax TA 的相對標(biāo)準(zhǔn)差范圍為 0.4% 至 2.8% 。

　　8.4 準(zhǔn)確度： 20 ℃、相對濕度為 50% 的條件下，在吸附管上加入 10mg/ml 的正己烷， Tenax TA 、Tenax GR ( 5 次測定的平均值)的總不確定度為 8.9% 。

　　附錄 E

　　(規(guī)范性附錄)

　　室內(nèi)空氣中**總數(shù)檢驗方法

　　1、適用范圍

　　本方法適用于室內(nèi)空氣**總數(shù)測定。

　　2、定義

　　撞擊法 (impacting method)是采用撞擊式空氣微生物采樣器采樣，通過抽氣動力作用，使空氣通過狹縫或小孔而產(chǎn)生高速氣流 ,使懸浮在空氣中的帶菌粒子撞擊到營養(yǎng)瓊脂平板上 , 經(jīng) 37 ℃、 48h 培養(yǎng)后 ,計算出每立方米空氣中所含的**菌落數(shù)的采樣測定方法。

　　3、儀器和設(shè)備

　　3.1 高壓蒸汽**器。

　　3.2 干熱**器。

　　3.3 恒溫培養(yǎng)箱。

　　3.4 冰箱。

　　3.5 平皿 ( 直徑 9cm) 。

　　3.6 制備培養(yǎng)基用一般設(shè)備：量筒，三角燒瓶， pH 計或精密 pH 試紙等。

　　3.7 撞擊式空氣微生物采樣器。

　　采樣器的基本要求 :

　　(1) 對空氣中**捕獲率達 95 %。

　　(2) 操作簡單 , 攜帶方便 , 性能穩(wěn)定 , 便于**。

　　4 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

　　4.1. 成分 :

　　蛋白胨 20g

　　牛肉浸膏 3g

　　氯化鈉 5g

　　瓊脂 15~20g

　　蒸餾水 1000ml

　　4.2 制法 將上述各成分混合 , 加熱溶解 , 校正 pH 至 7.4 ，過濾分裝， 121 ℃， 20min高壓**。撞擊法參照采樣器使用說明制備營養(yǎng)瓊脂平板。

　　5 操作步驟

　　5.1 選擇有代表性的房間和位置設(shè)置采樣點。將采樣器** , 按儀器使用說明進行采樣。

　　5.2 樣品采完后，將帶菌營養(yǎng)瓊脂平板置 36 ± 1 ℃恒溫箱中 , 培養(yǎng) 48h ，計數(shù)菌落數(shù) ,并根據(jù)采樣器的流量和采樣時間 , 換算成每 m 3 空氣中的菌落數(shù)。以 cfu/m 3 報告結(jié)果。

　　附錄 F　　

　　(規(guī)范性附錄)

　　熱環(huán)境參數(shù)的檢驗方法

　　熱環(huán)境參數(shù)測試的要求、方法和儀器 *

　　測試項目 測試范圍 準(zhǔn)確度 測試方法和儀器

　　溫度 -10~50 ℃ ± 0.3 ℃ 玻璃溫度計(包括干濕球溫度計)

　　數(shù)字式溫度計(熱電偶、熱電阻、半導(dǎo)體式包括數(shù)字式濕度計或風(fēng)速計所附的溫度計)

　　相對濕度 12%~99% ± 3% 干濕球溫度計

　　氯化鋰露點式濕度計

　　電容式數(shù)字濕度計

　　空氣流速 0.01~20m/s ± 5% 熱球式電風(fēng)速計

　　專線式電風(fēng)速計

　　* 各種測試儀器的使用方法見儀器的使用說明書。

　　HPLC法測定布洛芬糖漿劑的含量

　　布洛芬糖漿劑除具有布洛芬片劑的藥效外，還具有吸收快、利于兒童服用等特點[1]。但由于布洛芬不溶于水，其糖漿劑中均含有堿性物質(zhì)以增加其溶解度[2，3]，所以不能再用藥典規(guī)定的中和法測定布洛芬含量。本文采用HPLC法測定了布洛芬糖漿劑的含量，獲得了較滿意的結(jié)果。

　　1　儀器與試藥

　　日本島津LC-6A高效液相色譜儀、SPD-6AV紫外檢測器、SCL-6B系統(tǒng)控制器、C-R4A數(shù)據(jù)處理機、LC-6A輸液泵。

　　布洛芬對照品：山東新華制藥廠生產(chǎn)，采用本文色譜條件檢查為單一色譜峰，含量為99.80%;布洛芬糖漿劑[3]：自制，標(biāo)示量為2%(g.mL-1);二苯胺(內(nèi)標(biāo))及無水甲醇均為分析純。

　　2　色譜條件

　　色譜柱：YWG?C18 4.6 mm×250 mm;流動相：取磷酸二氫鈉380 mg與磷酸氫二鈉50mg，加水溶解至1000 mL，用磷酸調(diào)pH至3.0，取出250 mL加甲醇750 mL，混勻。流速：1mL.min-1;檢測波長220 nm;進樣量20 μL;檢測靈敏度：0.01 AUFS。

　　3　標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

　　精密稱取二苯胺適量，加無水甲醇配制成0.7mg.mL-1的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。另取布洛芬對照品適量，精密稱定，加無水甲醇配制成0.27mg.mL-1的溶液，作為對照品溶液。精密量取對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、5.0mL，分別置于50mL量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)溶液1.0 mL，用無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，進樣20μL。以對照品與內(nèi)標(biāo)的峰面積之比為縱坐標(biāo)，相應(yīng)對照品濃度(mg.mL-1)為橫坐標(biāo)，得回歸方程：Y=75.5X+0.0136　r=0.9997結(jié)果表明，布洛芬溶液濃度在3～30μg.mL-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。二苯胺及布洛芬的色譜圖圖1　二苯胺及布洛芬的色譜圖

　　1.二苯胺　2.布洛芬

　　4　回收實驗

　　取布洛芬對照品約100 mg，精密稱定，定量轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中，按**加入單糖漿、L-精氨酸、苯甲酸鈉、香精，用無水甲醇稀釋至刻度，搖勻。精密取上述溶液及內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，按“樣品測定”項下操作。測得平均回收率為99.89 %，RSD為0.93%，n=6。

　　5　樣品測定

　　取布洛芬糖漿劑約2.5 mL，精密稱定，定量轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中，用無水甲醇稀釋至刻度，搖勻。精密吸取上述溶液及內(nèi)標(biāo)溶液各1 mL置于50 mL量瓶中，用無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，進樣20μL。測得樣品的含量為標(biāo)示量的97.23 %，n=5，RSD為0.89 %。

　　6　討論

　　經(jīng)穩(wěn)定性試驗觀察，樣品溶液在室溫下(約18　℃)放置，每隔2 h測定1次，測至6h，樣品標(biāo)示百分含量結(jié)果的RSD為0.99%，n=3。說明樣品溶液較穩(wěn)定。

　　以安定為內(nèi)標(biāo)物，效果也較好。但由于筆者想將該法用于布洛芬糖漿劑生物利用度測定，為防止人體內(nèi)安定類**的干擾，所以選擇二苯胺為內(nèi)標(biāo)。

　　雙甘瞵的HPLC分析條件

　　摘要：

　　試劑和溶液：

　　四丁基硫氫酸胺，

　　色譜純甲醇

　　色譜純磷酸

　　AR磷酸二氫鉀

　　AR水:二次蒸餾水

　　雙甘瞵標(biāo)樣

　　流動相：

　　0.05moLKH2PO4，200mL+50mL甲醇+0.5

　　色譜柱：Sinochrom ODS-BP 150mmX4.6mm 5um

　　流量：1mL/min

　　波長：195nm

　　柱溫：35度。

　　HPLC同時測定大黃素和大黃酚的含量

　　大黃的有效成分為大黃素、大黃酚、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素甲醚及其甙類等蒽醌類成分。有關(guān)大黃及其制劑有效成分含量測定方法報道很多，如比色法、薄層-紫外分光光度法、HPLC法等。這里簡單介紹一下HPLC法同時測定大黃素和大黃酚含量時的色譜條件、樣品處理方法等。

　　⑴《中國藥典》2005版大黃含量測定項：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-0.1%磷酸溶液(85：15)為流動相。檢測波長為254nm。對照品為蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚。大黃樣品前處理：甲醇回流提取—8%鹽酸超聲—三氯甲烷回流萃取。

　　⑵趙莉，晁若冰測定了大黃通便膠囊中大黃素和大黃酚的含量。色譜條件同⑴。儀器：LC-IOATvp高效液相色譜儀，SPD-M10A vp光二極管陣列檢測器，Class-vp色譜工作站(日本島津)。用Luna 5 uCl8(2)柱(150 mm×4.6 mm，ID)，ODS預(yù)柱Phenomenex ODS guard cartridgesystem，4.0mm×3.0mm，ID)。樣品先用甲醇回流提取，提取物在2.5mol/L硫酸溶液中加熱水解，再用氯仿提取后進行測定。

　　⑶張華，雪秦嵐，趙宏科，趙海云采用HPLC測定血脂靈片中大黃素、大黃酚的含量。色譜條件同⑴，檢測波長428nm。儀器：高效液相色譜儀(包括P200Ⅱ型高壓恒流泵，UV-200Ⅱ型紫外檢測器，Echrom98色譜數(shù)據(jù)處理工作站)，Shim-Pack型C18分析柱(200mm×4.6mm，5μm)

　　⑷常軍民，高宏，張煊，趙軍，堵年生采用HPLC測定枝穗大黃中大黃素和大黃酚的含量。色譜條件同⑴。儀器：美國Waters2690高效液相色譜儀，Waters 2487雙波長檢測器，Waters millennium s 色譜工作站(Waterscorporation)。

　　⑸魏有良，楊志一，霍彬科采用HPLC法測定化癥回生片中大黃素和大黃酚的含量。色譜條件同⑴。樣品處理：甲醇回流，再上中性氧化鋁柱(100-200目，直徑1.5cm，3.5g)，先用甲醇洗脫，5%氫氧化鈉洗脫，收集鹽酸調(diào)Ph1-2，乙醚萃取。

　　⑹王勁，李潔，馬彥，田佩瑤，彭國克采用HPLC法測定中藥**產(chǎn)品中大黃酚和大黃素的含量。色譜條件：天津特納KromasilC18(200mm×4.6mm i.d.，7μ)色譜柱，流動相：φ=0.02mol/LKH2PO4水溶液(H3PO4調(diào)pH=3.5)/甲醇=15/85，柱溫：室溫，流速：1.0mL/min，紫外檢測波長：260nm。儀器：美國Waters公司2695高效液相色譜儀(996二極管陣列檢測器，MiUennium32色譜管理系統(tǒng))。

　　HPLC法同時測定大黃素和大黃酚的含量時，文獻報道所采用的色譜條件多為藥典所載的條件。流動相為甲醇-磷酸系統(tǒng)，另外還有乙腈-磷酸系統(tǒng)、甲醇-水系統(tǒng)、甲醇-高氯酸系統(tǒng)、甲醇-冰醋酸系統(tǒng)等;檢測波長多為254nm，也有采用430、440、438、287nm。也有以甲醇-水-異丙醇(80：10：10)磷酸調(diào)pH值為3.0，檢測波長：439nm。樣品處理方面一般用適當(dāng)溶劑回流提取，除去溶劑后氧化水解，再以有機溶劑萃取。酸溶液多為鹽酸和硫酸。

　　HPLC法在生物堿分析中的應(yīng)用

　　生物堿是植物中一類重要化學(xué)成分，許多生物堿或含生物堿的提取物已廣泛用于醫(yī)藥領(lǐng)域，因此對不同來源的、存在于較復(fù)雜體系或基質(zhì)中的生物堿進行快速、靈敏、可靠的定性和定量分析一直是受人矚目的研究課題。

　　1、生物堿HPLC的分析模式

　　根據(jù)HPLC分析生物堿時所使用固定相性質(zhì)、流動相組成及極性不同，其分析模式大致可分為：正相吸附色譜法、正相硅膠反相洗脫系統(tǒng)色譜法、反相色譜法及離子交換色譜法。

　　正相吸附色譜法：通常以硅膠基質(zhì)為吸附固定相，流動相為不同極性的有機溶劑或不同比例混合溶劑，分離過程主要依靠生物堿與吸附劑吸附作用的差異實現(xiàn)，為了改善分離，提高溶洗脫能力，常于流動相中加濃氨液、二乙胺、三乙胺等。該法應(yīng)用于生物堿分析的文獻較少。

　　正相硅膠一反相洗脫系統(tǒng)色譜法(NS-RE)：通常采用未經(jīng)化學(xué)改性的普通硅膠為固定相，以極性有機溶劑(甲醇、乙腈)和高pH緩沖溶液為流動相，分析包括生物堿在內(nèi)的堿性**。該法柱效高，峰形對稱，是簡便有效的方法。在實際應(yīng)用中，流動相的組成是主要的影響因素，流動相中除含有調(diào)節(jié)pH的緩沖鹽外，有時還要三乙胺、溴化四丁基銨等競爭離子或烷基磺酸鈉等對離子。因此，影響保留與分離的主要因素是流動相pH、競爭離子種類及濃度。

　　反相高效液相色譜法(RP-HPLC)：近年來RP-HPLC應(yīng)用于生物堿分析方面的文獻很多，已成為常規(guī)的方法。但普通存在色譜峰的展寬拖尾，導(dǎo)致分離效能低，這主要緣于生物堿結(jié)構(gòu)中堿性氮原子與固定相未鍵臺酸性硅醇基的相互作用。即使是所測生物堿在較低濃度下，仍常產(chǎn)生峰漂移及峰對稱性差等現(xiàn)象。針對此缺陷，研究工作者從適用于堿性物質(zhì)分析的反相填料的設(shè)計選擇，流動相中緩沖鹽的使用，流動相添加劑(離子對試劑、有機胺改性劑)等幾方面進行了較為廣泛細(xì)致的研究，并取得了一定的進展。

　　離子交換色譜法：該法以陽離子交換樹脂為固定相，利用質(zhì)子化的生物堿陽離子與離子交換劑交換能力的差異而達到分離生物堿的目的，有關(guān)生物堿高效液相離子交換色譜法的應(yīng)用報道較少。

　　2、生物堿HPLC分析檢測方法

　　目前，生物堿HPLC分析檢測方式多以紫外法為主，在定性分析方面，紫外法檢測選擇性低，定性專屬性差。隨著二極管陣列檢測器使用的普及，顯著提高了液相分析檢測的選擇性。此外，根據(jù)生物堿的理化性質(zhì)，其它檢測方式如熒光法、電化學(xué)法、蒸發(fā)光散射法亦得到了應(yīng)用。近年來，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)已應(yīng)用于生物堿分析，增強了對生物堿的定性檢測能力，提高了檢測靈敏度。新的接口技術(shù)及離子化方法的發(fā)展.使得HPLC-MS在生物堿的分析中得到較廣泛的應(yīng)用，近年的文獻報道日漸增多。

　　3、生物堿HPLC分析的樣品處理方法

　　因生物堿常具有一定的堿性，一般常用堿化液液萃取或酸水提取等方法從***、中成藥及生物樣品等較復(fù)雜體系中提取純化，以達到富集和去除雜質(zhì)的目的。近年來，固相萃取(SPE)技術(shù)及超臨界流體萃取等現(xiàn)代提取純化技術(shù)亦應(yīng)用于樣品的提取純化。

　　HPLC法快速測定食品中糖精鈉、苯甲酸、山梨酸和***

　　苯甲酸、***等食品添加劑食用過量會對人體造成傷害，國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)對這幾項指標(biāo)有明確的限量，因此開展了此項調(diào)查。試驗表明，液相色譜測定各類食品中糖精鈉、苯甲酸、山梨酸和***時，即使是可樂等清涼飲料，樣品經(jīng)過脫氣、稀釋、過濾的簡單處理即上機分析，也極易堵塞色譜柱，造成柱壓升高、柱效下降，對色譜柱造成難以修復(fù)的損壞;而樣品經(jīng)透析處理耗時太長。本文論述了在常溫下用氫氧化鈉-硫酸鋅作為蛋白質(zhì)沉淀劑，沉淀處理包括清涼飲料、酸奶、花生乳等比較粘稠的飲料以及固體食品等各類樣品中的蛋白質(zhì)、淀粉等雜質(zhì)，可以大大降低對色譜柱的損害，在一定的色譜條件下，在常溫下即可快速、同時分離四種被測組分，操作極為簡單、快速。

　　1 試驗部分

　　1.1 原理

　　糖精鈉、***是易溶于水的鹽類，樣品中的苯甲酸、山梨酸經(jīng)氫氧化鈉溶液(O.50mol/L)浸泡后，轉(zhuǎn)化為易溶于水的苯甲酸鈉、山梨酸鈉，經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、過濾等處理后，四種被測組分滯留于水相中與雜質(zhì)分離。

　　1.2 儀器與試劑

　　島津LC-10AT高效液相色譜儀

　　色譜柱：Hypersil-ODS2-C18，4.6 mm X 1 50 mm柱

　　檢測波長215nm，進樣量2OμL，流動相為甲醇+O.02mol/L 乙酸銨(35+65)，流量0.50mL/min。

　　苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：1.000g/L，稱取苯甲酸0.1000g，加20g/L碳酸氫鈉溶液5mL，加熱溶解，定容至100mL。

　　山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：1.000g/L，同苯甲酸配制。糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：1.000g/L，稱取糖精鈉0.1702g，加水溶解，定容至200mL。

　　***標(biāo)準(zhǔn)溶液：1.000g/L一，稱取***0.1000g，加水定容至100mL。

　　混合標(biāo)準(zhǔn)液：糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、***濃度依次為4.5，5.0，5.0，5.0 mg/L。

　　氫氧化鈉溶液：0.50mo1/L

　　硫酸鋅溶液：0.42 mol/L_

　　乙酸銨溶液：0.02 mol/L，稱取乙酸銨1.54g用水定容至1L。

　　甲醇(色譜純)

　　1.3 試驗方法

　　1.3.1 液體樣品

　　稱取樣品0.100～5.00g于50mL比色管中(汽水振搖或微溫除去二氧化碳，配制酒類水浴加熱，除去乙醇)，加入純水約5mL，加入0.50mol/L氫氧化鈉溶液1.00mL，攪勻，放置15min，混勻，加人純水約30L，加人0.42mol/L 硫酸鋅溶液1.50 mL，混勻，加人0.50mol/L氫氧化鈉溶液1.50mL，搖勻，純水定容至50.0mL，混勻，靜置幾分鐘，上清液過濾(雙層濾紙)，棄去初濾液5mL，濾液經(jīng)0.45μm濾膜過濾，進樣量2Oμl，進行色譜分析，以保留時間定性，以峰高定量。

　　1.3.2 固體樣品

　　稱取研碎的樣品0.100～2.00g于5OmL比色管中，加人純水約30mL，加人0.50mol/L氫氧化鈉溶液1.00mL，攪勻，放置15min以上(直到被測組分完全溶出為止)，加人0.42mol/L硫酸鋅溶液1.50mL，混勻，其它操作同上。

　　2 結(jié)果與討論

　　2.1 蛋白質(zhì)沉淀劑種類的選擇

　　2.1.1 亞鐵***與乙酸鋅的沉淀分離效果分別稱取苯甲酸、山梨酸0.100Og用10mL甲醇溶解純水定容至100mL，配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液，純水稀釋至所需濃度，選取飲料杏仁乳一份，做苯甲酸、山梨酸的加標(biāo)回收試驗。稱取飲料樣品2.00g于50mL比色管中，加人苯甲酸、山梨酸各250μg，加入純水約25mL，混勻，加人106g/L亞鐵***溶液2.5mL，混勻，加入220g/L乙酸鋅溶液2.5mL，混勻，純水定容至50mL，靜置幾分鐘，上清液過濾，棄去初濾液5mL，濾液經(jīng)0.45μm濾膜過濾，進人色譜儀進行分析，進樣量2OμL，以保留時間定性，以峰高定量。

　　試樣經(jīng)亞鐵***與乙酸鋅沉淀后，溶液的pH在5～6范圍內(nèi)，對樣品中的糖精鈉、苯甲酸鈉、山梨酸鉀(鈉)、***的測定無影響，但對樣品中的苯甲酸、山梨酸的測定有影響，加標(biāo)回收率較低(在78.2～87.8之間)。因苯甲酸、山梨酸在水中的溶解度較低，加人蛋白質(zhì)沉淀劑以后，與雜質(zhì)一起被沉淀，影響測定的準(zhǔn)確性。由于難以確定飲料中的苯甲酸、山梨酸是否為鉀鹽、鈉鹽，建議不采用該蛋白質(zhì)沉淀劑。

　　2.1.2 氫氧化鈉與硫酸鋅的沉淀分離效果

　　試樣經(jīng)該蛋白質(zhì)沉淀劑沉淀后，對樣品中的糖精鈉、苯甲酸(鈉)、山梨酸(鉀)、***的測定(加標(biāo)回收)均無影響，建議采用該蛋白質(zhì)沉淀劑。

　　按試驗方法進行氫氧化鈉與硫酸鋅不同比例的試驗。

　　當(dāng)0.50mol/L氫氧化鈉溶液與0.42mol/L硫酸鋅溶液用量為5：4時，沉淀效果*好，但保留時間發(fā)生滯后現(xiàn)象，不宜采用;兩者用量為5：3時，定量與定性均準(zhǔn)確，且濾液澄清，過濾速度也較快，這恰好與理論上氫氧化鈉與硫酸鋅形成完全沉淀時所需的比例(nOH：nZn2+=2：1)相吻和，但兩者用量太少時，沉淀不完全;為使雜質(zhì)完全沉淀，選擇氫氧化鈉用量為2.50mL、硫酸鋅1.50mL為處理0.100～5.0g飲料、0.100～2.O0g固體樣品的*佳用量。

　　2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程

　　按試驗方法進行測定，4種添加劑的線性范圍、檢出限(按3倍信噪比計算)的測定。

　　2.3 樣品測定結(jié)果

　　選擇含不同被測組分的飲料樣品，分別平行測定7次。

　　選擇可樂飲料l份，分別做高、中、低濃度的加標(biāo)回收試驗。

　　2.4 食品中糖精鈉、苯甲酸、山梨酸和***含量的調(diào)查

　　調(diào)查了市售飲料其中包括可樂、汽水、果汁、酸奶、牛奶、活性乳、花生乳、果凍、冰棍等共57份，其中5份含***0.0023～O.270g/kg，17份含糖精鈉0.053～0.966g/kg，7份含苯甲酸0.0038～O.230g/kg，16份含山梨酸0.090～0.770g/kg;醬菜、熟肉制品、熟面制品40份，4份含糖精鈉0.916～1.04g/kg，8份含苯甲酸0.005O～5.68g/kg，3份含山梨酸0.10～0.680g/kg;醬、醬油、醋、料酒共24份，其中15份含苯甲酸0.030～1.73g/kg，1份含山梨酸0.220g/kg。

　　HPLC法鑒別五味子與南五味子

　　五味子為木蘭科植物五味子SchisandraChinensis(Turcz)Bail1.的干燥成熟果實，習(xí)稱“北五味子”，具有收斂固澀、**生津、**寧心的功效?。南五味子為木蘭科植物華東五味子

　　Schisandra sphenanthe Rehd.etWills.的干燥成熟果實，功效與五味子相似。中藥成方制劑中都明確指定用何種五味子，且《中國藥典)2000年版分別單獨制定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。市場上這兩種五味子價格相差較大，因此鑒別很重要。《中國藥典)2000年版收載的標(biāo)準(zhǔn)中有薄層色譜鑒別，都采用了五味子甲素作為對照品，再分別用各自的對照藥材作對照。作者多次實驗結(jié)果表明薄層色譜鑒別對兩種五味子鑒別專屬性不強。本文則采用HPLC法進行鑒別，重復(fù)性好、靈敏度高且直接分析的是其特征峰，鑒別結(jié)果不受環(huán)境等因素干擾，為五味子的鑒別提供了可靠的手段。

　　1 儀器和試藥

　　1.1 儀器：高效液相色譜儀(泵：SP1000，檢測器UV2000，N2000工作站，美國光譜物理公司)。

　　1.2試藥：五味子對照藥材(批號：0922—9803中國藥品生物制品檢定所);五味子(毫州恒豐藥材公司);南五味子(毫州恒豐藥材公司)。色譜純甲醇;超純水。

　　2 方法與結(jié)果

　　2.1 對照藥材溶液的制備：取五味子對照藥材粉末約0.25 g，置25 mL量瓶中，加甲醇約18 mL，超聲處理(功率250W ，頻率20 kHz)30分鐘，取出，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。

　　2.2 色譜條件：色譜柱：AllitimaC18(4.6 mm×250mm)。流動相：甲醇.水(13：7)。檢測波長：250 nm。流速：0.8mL/min。柱溫：25℃ 。

　　2.3 供試品溶液的制備

　　2.3.1 五味子藥材提取液的制備：取五味子藥材粉末(過3號篩)約0.25 g，置25 mL量瓶中，加甲醇約18mL，超聲處理30分鐘，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。

　　2.3.2 南五味子藥材提取液的制備：取南五味子藥材粉末(過3號篩)約0.25 g，置25 mL量瓶中，加甲醇約18mL，超聲處理30分鐘，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。

　　2.4 圖譜的繪制：分別精密吸取對照藥材溶液與供試品溶液各20 L，注入液相色譜儀，測定，見表1。

　　從表1中可以看出，五味子對照藥材共9個峰，樣品五味子共8個峰，南五味子共6個峰，樣品五味子與對照藥材相比少1個峰，其它峰保留時間都一致，南五味子少了3個峰，且只有1個峰相一致，由此，可以鑒定出五味子。經(jīng)過多次實驗結(jié)果，對照藥材1、2、6、7、8號峰是五味子的主要特征峰，且峰面積較大。

　　3 小結(jié)與討論

　　高效液相色譜法以保留時間為主要鑒別參數(shù)，若因儀器廠家、色譜柱等條件不同，則保留時間可能產(chǎn)生較大差異，導(dǎo)致圖譜鑒定操作性不強，而采用對照藥材作為對照。排除了上述因素的影響。峰號具體成分因無法買到對照品而不能確定。藥廠采購五味子時，摻雜南五味子時有發(fā)生，應(yīng)仔細(xì)對照藥典標(biāo)準(zhǔn)進行鑒別，當(dāng)初步鑒定為五味子，或者若懷疑有部分為南五味子時，則可以挑選出這兩種五味子。再與對照藥材分別進行HPLC圖譜鑒別，方法簡便可行。

　　HPLC法檢查甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF

　　摘要　采用高效液相色譜法測定甲硝唑葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛，以C18為固定相，以甲醇-0.2%磷酸溶液(25∶75)為流動相，檢測波長為284nm，平均回收率為99.2%(RSD=0.61%)。

　　《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》〔1〕收載的甲硝唑葡萄糖注射液項下5-羥甲基糠醛(5-HMF)檢查要求該品1∶25稀釋后在284nm波長處吸收度不得大于0.25。但實驗證明，按上法進行甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF檢查，其吸收度遠(yuǎn)大于0.25(1.50以上)。因為甲硝唑在284nm處有吸收。中國藥典1995年版〔2〕對甲硝唑葡萄糖注射液尚未規(guī)定5-HMP的限量檢查〔2〕。為保證用藥**，本文建立了高效液相色譜法測定甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的含量，可消除甲硝唑的干擾。現(xiàn)報道如下。

　　1　儀器與試藥

　　1.1　儀器　Waters 501泵，484檢測器，7725進樣器(美國)。

　　1.2　試藥　甲硝唑(浙江可立思安制藥公司);5-羥甲基糠醛(美國Sigma公司，H9877);甲硝唑葡萄糖注射液(浙江省新昌制藥廠，971105，971213，980124，980213，980321);甲醇(色譜純)。

　　2　方法與結(jié)果

　　2.1　色譜條件　色譜柱：Nova-pack C18(200 mm×4.6 mm, 4μm);流動相：甲醇-0.2%磷酸溶液(25∶75);檢測波長：284 nm;流速：1.0 ml/min。

　　2.2　試液的配制　精密稱取5-HMF適量，加水溶解成0.5 mg/ml的溶液為5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

　　2.3　標(biāo)準(zhǔn)曲線制備　精密量取5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量，用水分別稀釋成5，10，15，20，25 μg/ml的溶液;取10μl注入色譜儀中，在上述色譜條件下測得峰面積(見圖1);以峰面積Y對濃度X繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程y=1254x+47，r=0.9986，表明在濃度5～25μg/ml范圍內(nèi)線性良好。另取10 μl試樣重復(fù)進行，峰面積RSD=0.48%(n=6)。

　　2.4　回收率測定　精密量取已測得5-HMF含量的甲硝唑葡萄糖注射液50 ml，置100ml量瓶中，精密加入5-HMF標(biāo)準(zhǔn)儲備液1ml，加水至刻度;按樣品測定項下方法，計算平均回收率為99.2%，RSD=0.61%(n=5)。

　　2.5　樣品5-HMF含量檢測　精密量取甲硝唑葡萄糖注射液10μl注入色譜儀，按上述色譜條件，測得5-HMF的色譜峰面積;另精密量取5-HMF標(biāo)準(zhǔn)溶液10μl注入色譜儀中，同法測得峰面積，按峰面積外標(biāo)法計算，結(jié)果5批樣品中5-HMF含量分別為6.1，8.3，8.6，10.9，14.7μg/ml。

　　3　討論

　　實踐證明，若生產(chǎn)過程不規(guī)范(如**溫度過高，時間過長)很容易導(dǎo)致5-HMF含量偏高。因此，控制甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的限量對確保用藥**具有重要意義。

　　HPLC法測定紫草油中**紫草素的含量

　　摘要：目的建立紫草油中**紫草素的含量測定方法。方法：采用HPLC法測定紫草油中**紫草素的含量，色譜柱：島津Shim-packVP-ODS柱(4.6mm×250mm);甲醇-0.025mol/L磷酸(85：15)為流動相;檢測波長：516nm;柱溫：25℃;進樣量：20μL。結(jié)果：**紫草素在11.2μg/mL～33.6μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9998);平均回收率為101.3%，RSD=1.90%(n=5)。結(jié)論：該方法簡便、準(zhǔn)確，能排除其他成分的干擾，可用于紫草油的質(zhì)量控制和評價。

　　紫草油是我院的醫(yī)院制劑，由紫草、銀花藤、白芷等中藥組成，具有涼血**的作用，臨床用于**的**，紫草為方中君藥，其有效成分為紫草素，而紫草素含量的高低，直接影響其臨床療效。本實驗采用HPLC法測定紫草油**紫草素的含量，方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，為控制該制劑的內(nèi)在質(zhì)量提供了可靠的方法。

　　l儀器與試藥

　　1.1儀器高效液相色譜儀LC-1OA，SPD-10AVP紫外檢測器(日本島津);CK chrom dataacquieition lO 15system (美國TSP)。

　　1.2試藥

　　**紫草素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號0769—9903);紫草油(本院制劑室提供);超純水;甲醇為色譜純，其余試劑為分析純。

　　2方法與結(jié)果

　　2.1色譜條件色譜柱：島津Shim-packVP-ODS柱(4.6mm×250mm);流動相：甲醇-0.025mol/L磷酸(85：15);流速：1.0 mL/min;檢測波長：516nm;柱溫：25℃;進樣量：20μL(定量環(huán))。

　　2.2對照品溶液的制備 精密稱取**紫草素對照品2.8mg，置25mL量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋至刻度，制成每mL含112.0μg的溶液，作為對照品儲備液。精密吸取對照品儲備液(112.0μg/mL)1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 mL置于10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度。

　　2.3供試品溶液制備精密吸取樣品10mL，置分液漏斗中，加入1%氫氧化鈉溶液20mL振搖提取3次，每次20mL，合并堿液，加10%鹽酸溶液，調(diào)pH值至酸性(pH2.5～3.5)，用氯仿萃取4次(30，30，30，20mL)，合并氯仿液，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解并定量轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，加甲醇溶液至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。

　　2.4線性關(guān)系考察取濃度為11.2，16.8，22.4，28.0，33.6μg/mL的對照品溶液，分別進樣20μL，測得峰面積，以濃度(C)對峰面積積分值(A)進行線性回歸，回歸方程為A=2.521×10000C一4265，r=0.9998。表明**紫草素在11.2μg/mL～33.6μg/mL濃度范圍內(nèi)，與峰面積積分值呈良好線性關(guān)系。

　　2.5精密度試驗取同一份供試品溶液，每次20μL，重復(fù)進樣6次，結(jié)果平均峰面積為757099，RSD=0.78%(n=6)。

　　2.6穩(wěn)定性試驗取供試品溶液依上述色譜條件，每隔1h測含量1次(n=5)，次日測定2次，積分值無明顯變化，平均峰面積為742531，RSD為1.01%(n=7)。

　　2.7重復(fù)性試驗取同批樣品(批號020816)5份，依2.3項下方法制備，照上述色譜條件測定，結(jié)果平均含量為58.0μg/mL，RSD為0.90%(n=5)。

　　該方法符合重復(fù)性要求。

　　2.8加樣回收率試驗精密吸取已知含量的樣品溶液，精密加入一定含量的**紫草素對照品溶液，依法提取、進樣、測定。

　　2.9樣品測定取4批樣品各10mL，依法制成供試品溶液，均以20μL進樣，分別測定吸收峰面積，外標(biāo)法計算**紫草素含量。

　　3討論

　　紫草油為油制劑，方中主藥紫草的有效分為紫草素及其衍生物，屬于萘醌色素類化合物。有文獻報道用紫外分光光度法及薄層掃描測定紫草素的含量，本方法采用HPLC測定紫草油中**紫草素的含量，簡便、靈敏、準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可用于本品的質(zhì)量控制。樣品測定結(jié)果表明，各批號紫草油中**紫草素含量差異較大，通過對成品顏色的觀察發(fā)現(xiàn)，**紫草素含量高的成品顏色深紅，而所測含量較低的成品顏色較淺，這可能與紫草原藥材的質(zhì)量有關(guān)，故應(yīng)嚴(yán)格控制原藥材的來源與質(zhì)量，并且應(yīng)加強本制劑中間產(chǎn)品紫草素的質(zhì)量控制。

　　薄層色譜法的相關(guān)知識簡介

　　薄層色譜法，系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開后，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比，用以進行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。

　　1.儀器與材料

　　(1) 玻板除另有規(guī)定外，用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的規(guī)格,要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

　　(2) 固定相或載體 *常用的有硅膠G、硅膠GF<[254]> 、硅膠H、硅膠HF<[254]>,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、 微晶纖維素F<[254]>等。其顆粒大小,一般要求直徑為10～40μm。薄層涂布,一般可分無粘合劑和含粘合劑兩種;前者系將固定相直接涂布于玻璃板上,后者系在固定相中加入一定量的粘合劑，一般常用10～15%煅石膏(CaSO4.2H2O在140℃烘4小時)，混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液(0.5～0.7%)適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻璃板上。也有含一定固定相或緩沖液的薄層。

　　(3) 涂布器 應(yīng)能使固定相或載體在玻璃板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

　　(4) 點樣器 同紙色譜法項下。

　　(5) 展開室 應(yīng)使用適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開缸，并有嚴(yán)密的蓋子，除另有規(guī)定外，底部應(yīng)平整光滑，應(yīng)便于觀察。

　　2.操作方法

　　(1) 薄層板制備除另有規(guī)定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后，倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2～0.3mm)，取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。

　　(2) 點樣除另有規(guī)定外，用點樣器點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2.0cm，樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

　　(3) 展開展開室如需預(yù)先用展開劑飽和，可在室中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封室頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5～1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中),密封室蓋,待展開至規(guī)定距離(一般為10～15cm),取出薄層板，晾干，按各品種項下的規(guī)定檢測。

　　(4) 如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量，則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點及使用說明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與對照品在同一塊薄層上展開后掃描，進行比較并計算定量，以減少誤差。各種供試品，只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。