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生物樣品處理方式方法

------北京星越生物科技有限公司

      破碎是進行隔離或定性RNA、DNA、蛋白質和分析物的初期步驟。化學性和機械性（物理性）破碎法都可使用，但較多樣品類型傾向使用化學性方法(例如：大腸桿菌及培養細胞)。然而，許多微生物、未受破壞之組織、固體標本如種子、或大型樣品則不適用于化學性方法。針對這類有彈性的樣品，便會使用根據磨碎、剪切、敲打和振蕩為基礎的機械/物理性方法。機械/物理性破碎方法有機械式均質機、手動均質、研磨、超聲波破碎、混合碾磨機、渦旋機皆為常見的工具。這些樣品處理的方法雖然每日廣泛的使用，但未必被明確的了解。如同其它實驗室內廣泛使用的方法，這些方法經過研究人員的傳承，很少去解釋過程本身的意思。破碎和均質對實驗的影響可能很小，但同時，所選擇的工具與方法對實驗結果亦可能有很大的影響。
        可能的話，化學方法可能是優選的方法，例如:使用SDS裂解E. Coli，得到分離的質體，但此方法亦可能導致裂解液中有不需要的分子。化學方法對分離核酸是有效的，但使用去除劑和離液劑(detergents and chaotropes)使蛋白質變性(denature)。相同的問題也發生在蛋白質純化時，加入裂解酵素后，之后必須移除裂解酵素。若加入化學物質是不切實際且無法有效運作的話，則另一個方法便是使用機械式和物理式的破碎。
       機械/物理方式的破碎樣品包含研磨、剪切、敲打和震動。有時候，很難分辨不同力量的差別。為了簡單起見，我們以使用的工具來分類。如超聲波破碎儀、高壓破碎儀、組織研磨機、組織攪拌機、機械式均質機、渦旋震蕩器等。在這些工具和方法中，超聲破破碎和高壓破碎是目前比較先進方法，使用超聲破碎和高壓破碎進行樣品處理既避免了化學方**摻入不必要分子的不足，同時又能達到理想的破碎效果。事實上，美國BRANSON的超聲波破碎儀在生物細胞破碎樣品處理領域得到了廣泛的應用，受到很多專家學者的好評。
      理想的破碎**是使用一個或多個方法來達到需要的結果。實際上分離亞細胞碎片可能**步是使用剪刀切掉組織、接著使用手持式均質機研磨，*后使用超聲波破碎儀分離。若任何一個步驟省略，將得到較低的結果。

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