超聲法在革蘭氏菌破壁的應用

革蘭氏菌細胞壁較厚，而且有大量特殊組份磷壁酸，破壁難度很大；革蘭氏菌核酸分析、蛋白分析在生物醫藥領域又有著重要意義，所以破壁的方法選擇就尤為重要，在能保證破壁的高產率基礎上，又能實現所需胞內物質的高回收率，才是*佳選擇。超聲法由于自身優勢在革蘭氏菌破壁中得到廣泛應用。

可以用于革蘭氏菌破壁的方法主要有：

1.研磨法，可用的研磨劑有氧化鋁、玻璃珠、玻璃粉等。可以手動在研缽里磨，也可以研磨機。原理是：在**懸液中加入研磨劑，研磨時研磨劑顆粒碰撞而破碎細胞。

2.超聲法，使用超聲波細胞破碎儀，原理是：利用超聲波對細胞內所產生的空穴作用破菌，同時超聲過程產生的漩渦對菌體也有剪切力，有助于破菌。

3.壓力法，原理是：細胞懸液以極快的速度撞擊靜止面，使菌體破碎。工業生產中應用較多。

4.滲透法，將懸液與高滲透壓液體中平衡，再轉移至低滲透壓液體中，此時大量水分滲入細胞，使細胞破裂。只適合于胞壁較弱的革蘭氏陰性菌。可以和其他方法聯合使用。

5.凍融法, 原理是：細胞內胞液凍結時產生冰晶，體積增大，撐破菌體。

6.酶解法，分為菌體自溶和溶菌酶兩種方法。

超聲法優勢：相比于其他處理方法，超聲法可以更快的完成工作，且相對方便控溫。超聲法可實現極高的破碎率，節約樣品，減少重復次數。也能有效保留胞內物質的完整性，方便進行下一步研究。

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