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樣品前處理方式--使用冷凍研磨機于少量樣品研磨及優缺點

樣品前處理方式--使用冷凍研磨機于少量樣品研磨及優缺點

----北京星越生物科技有限公司

BRANSON（必能信）超聲破碎產品

少量樣品處理的回收率對一般的杵和硏砵是個挑戰，100mg或甚至更少的樣品會如一層粉末覆蓋在硏砵上并很難回收。冷凍研磨機提供了另一個選擇。冷凍研磨機本質上為一個微型杵臼，可用在非常少量的樣品，達到了樣品前處理所要求的結果。小型且緊密安裝的杵含有少量的樣品，可以讓研磨后的收集更加有效。冷凍研磨機使用與標準杵臼研磨相似，于冷凍研磨機使用時，冷凍研磨機需先冷卻，接著將樣品加入。**個主要不同的地方在于冷凍研磨機的力量是來自手持自動螺絲起子。這樣操作很麻煩，可考慮超聲波破碎儀來進行。

準備進行化學溶解或機械加工的樣品的程序中，樣品前處理**步很適合使用低溫研磨。其確實能讓樣品從大型固體研磨成小的微粒且不會輸入大量的熱能。樣品以較小的微粒尺寸可快速的溶解，如RNA隔離，使用變性溶劑或離液劑(chaotropes)。使用低溫研磨機或杵臼執行低溫研磨效率約可達到大部分一次性破壞方法的一半，*有效的兩階段步驟的29%。然而，與杵臼相比，冷凍研磨機確實可以產生比酵素釋放研究而更小的微粒。

使用冷凍研磨機進行樣品前處理的肌肉所釋放的相對酵素活性

冷凍研磨肌肉細胞確實減少樣品尺寸，但樣品前處理的均質效果明顯下降，效能為30%。

優點-冷凍研磨機處理少量的冷凍樣品前處理更加有效率。冷凍研磨機與杵臼研磨樣品都很有效率，但研究使用兩種方法均質肌肉組織的酵素分析指出，使用冷凍研磨機的方式會得到較好的酵素活性，即較小的微粒。加入萃取緩沖液，小的微粒會更迅速的溶解。另一個優點是系統是機動的，可以不另外費力的處理更多的樣品。

限制-冷凍研磨機僅能處理少量的樣品(100 mg或更少)，如此才能讓杵跟硏砵更有效的研磨。杵的尺寸也小，且必須保持在儲存桶內，例如制冷機(CryoCooler)，使他們保持在低溫狀態。

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